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编号:13135382
我国肉苁蓉寄主梭梭种质资源多样性的AFLP分析(2)
http://www.100md.com 2014年3月15日 《中国中药杂志》 2014年第6期
     2 方法与结果

    2.1 AFLP样品提取及检测

    2.1.1 模板DNA的提取 采用天根生物技术有限公司植物基因组DNA提取试剂盒,用CTAB法提取,1.2%琼脂糖检测DNA纯度、完整性及产量。

    2.1.2 酶切-连接 采用一步法[12]进行对所选样品采用EcoRⅠ/MseⅠ双酶切,酶切与连接反应同步进行。酶切与连接体系(20 μL)为:10×AFLP digest-ligation Buffer 2 μL,AFLP digest-ligation Enzyme Mix 1.8 μL,EcoRI Adaptor 1 μL (10 μmol·L-1),Mse I Adaptor 1 μL (10 μmol·L-1),模板DNA 5 μL,补ddH2O至20 μL。酶切-连接反应条件为25 ℃,5 h,1%琼脂糖电泳检测 ......
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