壮腰健肾丸对肾虚多尿大鼠膀胱组织中P2X1与P2X3 mRNA表达的影响(3)

http://www.100md.com 2015年4月15日 中国中药杂志2015年第8期

     cDNA合成：取无菌无酶PCR八连管放在冰块上，在超净工作台按试剂说明书依次加入：Total RNA，10 mmol·L^-1 dNTP Mix各2 μL，Oligo dT，Ribolcok TMRNase inhibitor (20 U·μL^-1)，RevertAid TM M-MμlV Reverse Transcripase(200 U·μL^-1)各1 μL;5×Reaction Buffer为4 μL;最后加DEPC-treated water 9 μL，使反应体系为20 μL。于热循环仪42 ℃ 1 h，70 ℃ 5 min，进行逆转录，得到cDNA(保存于-70 ℃)。

    引物设计：根据Genebank上GAPDH，P2X1与P2X3的mRNA序列 ......